臭氧医学的最新进展（译文）－－－臭氧医学爱好者必读！！！
Scientic and Medical Aspects of Ozone Therapy. State of the Art
Archives of Medical Research 37 (2006) 425–435
Velio Alvaro Bocci
Department of Physiology, Universityof Siena, Siena, Italy
Received for publication May 26, 2005; accepted August 26, 2005 (ARCMED-D-05-00204).
此篇文章的目的在于消除和澄清对于臭氧治疗仪器的误解和偏见，阐明以及溶于生物体液中臭氧作用的药理学机制。文章收集了近十年实验室工作，意在阐明应用在一些疾病的臭氧治疗。
2006 IMSS. Published by Elsevier Inc.
Key Words: Ozone, Antioxidants, Oxidative stress, Ozone tolerance, Ozone therapy.
序言
令人感到遗憾的是人们对于简单知道臭氧剂量的兴趣大于知道臭氧如何起作用以及为什么我们可以避免臭氧的毒性。以上的行为反应了人们对于臭氧基础知识的缺乏，反应了在以前应用臭氧之前的一种肤浅的仓促的准备。其实并不惊奇，在臭氧医学发展的初期，经验主义者起了很大的作用，当然也有几十年前科技不发达的原因以及作为不是专利产品的臭氧应用得不到资金支持的因素。1984年，德国已经命令禁止了臭氧的静脉注射这种治疗，因为有产生气栓的危险。还有就是禁止了用生理盐水混合臭氧进行静脉输注，因为溶液中可能产生过氯酸。美国有一名化学家断言“无论如何臭氧都是有毒”，加深了人们对于臭氧不能用于医学的错误观念。
在过去的十几年中，欧洲的科学家在临床水平和基础研究水平以严谨的科研风格进行了大量的工作来检测臭氧治疗。我们现在可以知道臭氧是如何起作用的，如何控制臭氧的毒性，如何扩大臭氧的治疗作用。基于经典的生物化学、生理学、药理学进行医学臭氧作用机理的研究使我们没有必要借用哲学思想来阐述相关的问题。
什么是臭氧，我们如何应用臭氧
臭氧是三个氧原子组成的具有环状结构的分子。医用臭氧发生器通过使用医用纯氧通过高电压来生成臭氧。结果是我们得到的气体是一种臭氧浓度不大于5％和氧气浓度不小于95％的混合气体。生成和承载臭氧的设备与介质都应该是具有抗臭氧的性质，如不锈钢、特富龙、玻璃、超高分子聚乙烯等材料。臭氧的密度是氧气的1.6倍，在水中的溶解性是氧气的10倍（在0摄氏度，100ml水中，可以溶解49ml的臭氧气体）。尽管臭氧不是一个自由基分子，但是它却有极强的氧化性，仅仅排在氟和过硫酸盐之后列所有氧化剂的第三位。臭氧是一种不稳定的气体，医用臭氧如不经过特殊的处理，应该制备之后立即使用，因为在常压下，周围温度是20摄氏度的情况下，臭氧的半衰期为40分钟。
臭氧是一种有争议的气体，尽管在大气层的平流层可以吸收B波段和C波段的紫外线辐射，在大气层的对流层对于呼吸道是有害的，特别是在光化学烟尘中和一氧化碳，二氧化氮和微量的酸混合时。
有一点是非常清楚的，如果我们在医学工作中使用臭氧，我们必须避免臭氧的毒性。如果我们操作足够细心，我们一定可以控制臭氧的毒性。
1、 使用剂量精确的臭氧发生器，设备配以标准良好光度计量计，进而允许我们实时的控制臭氧的浓度和剂量。
2、 通过预先设定浓度来制备精确体积的臭氧气体。臭氧的总体剂量可以通过臭氧浓度乘以臭氧体积来计算出臭氧的具体重量。现在已经有高档的臭氧发生器可以直接显示输出臭氧的质量。
3、 我们必须知道获得没有任何副总用而且具有最好治疗效果的最佳治疗剂量。
眼睛和肺脏对于臭氧是非常敏感的，因为这两个器官只有有最小的抗氧化和中和能力，因此臭氧不应该直接接触这些器官。
臭氧接触体液之后变化与行为
以下基本概念对于我们必须牢记：
1、 像其他气体一样，臭氧单纯的溶于纯水，根据亨利定律，和水温，气压，臭氧的浓度有关。封闭的容器中，臭氧不会发生作用。臭氧水作为一种有效的抗菌剂会保持活性数天的时间。
2、 在另外一方面，接触到生物液体（生理盐水、血浆、淋巴液、尿液）后，臭氧立即发生作用，进行反应。原子氧是非常具有活性的原子。需要强调的是，发生上述反应之后，臭氧将不再存在。而不是像以前的错误观念“臭氧会穿过皮肤和粘膜进入细胞”。在进行反应的顺序上，臭氧会和多不饱和脂肪酸，抗氧化物（尿酸、维生素C），巯基化合物（半胱氨酸、还原型谷胱甘肽，白蛋白）进行反应。根据臭氧浓度的不同，臭氧也可能和酶、碳水化合物、DNA、RNA发生反应。所有以上的化合物都是作为一种电子的供应者，承受着氧化作用。
3、 主要反应为：
R-CH＝CH-R＋O3＋H2O R-CH＝O + R’-CH=O + H2O2
该反应显示，在形成一摩尔的过氧化氢（过氧化氢是活性氧家族的一员，ROS）的同时，反应会产生两摩尔的脂质氧化物（LOPs）。活性氧家族中主要的分子就是过氧化氢，是一个非自由基的氧化剂，能够作为臭氧的信使负责引出下一步的生物学和治疗学方面的影像。活性氧被认为是有害的概念现在已经被校正，因为在生理量的情况，过氧化氢作为信号转录的调节器，并且充当宿主防御和免疫反应重要的中介物。
4、 脂质氧化物在多不饱和脂肪酸发生过氧化反应后出现在血浆中，生成的脂质氧化物是各种各样的，包括：脂过氧化物、烷氧基自由基、脂氢过氧化物、异前列烷、烯烃（4羟基反-2-壬烯醛、丙二酰二醛）。自由基和醛有内在的毒性，必须被控制在非常小的浓度。在体外实验中，幸运的是脂质氧化物表现出比活性氧更具有稳定性。它们在血液回输过程中，以上生成物被体液所稀释，被谷胱甘肽转移因子和醛脱氢酶代谢掉。所以只有微量的脂质氧化物可以到达体内的所有器官，特别是骨髓、肝脏、中枢神经系统，内分泌腺等。脂质氧化物在所到达的器官作为急性氧化应激的信号分子。
如果疾病的发展没有到非常晚期的时候，脂质氧化物能够引起抗氧化酶（超氧化歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶、谷胱甘肽还原酶、过氧化氢酶）的上调。有趣的是，通过诱导谷氨酸半胱氨酸连接酶的表达，4羟基反-2-壬烯醛（NHE）可以造成细胞内谷胱甘肽的增加，谷胱甘肽在抗氧化防御中有关键的作用。另外，脂质氧化物诱导氧化应激蛋白，是血红素加氧酶I型(HO-1或HSP-32)，在血红素分子破坏后，血红素加氧酶会释放出非常有用的化合物，如胆红素和CO。胆红素是非常好的亲脂抗氧化物，微量的CO的可以和NO共同作用通过激活环状环磷腺苷来调节血管舒张。血液中的铁通过螯合作用与上调的铁蛋白结合。氧化应激之后的血红素加氧酶I型诱导作用被数以百计的文章描述为最重要的抗氧化防御和保护酶之一。另外，脂质氧化物诱导神经免疫调节作用，在臭氧治疗过程中，病人良好的感觉就是上述反应的外在躯体表现。
尽管作为一种科学推测，在治疗整个过程中，脂质氧化物在骨髓的微环境中作为急性氧化应激因子刺激金属蛋白酶的释放，特别是金属蛋白酶MP-9可以促进雄蕊细胞的分化，这些细胞一旦进入血液循环会被吸引和“安家”到以前发生损伤的地方（创伤或缺血性退行性事件）。这样事件潜在的关联性有巨大的实际应用的重要性，在需要进行连续的不确定的再滴注时，将会避免不自然的，昂贵的、几乎没有实际作用的骨髓收集
需要强调的是微量的脂质氧化物将是有益的和激发性的。而高浓度的脂质氧化物将是有毒的。基于许多实验数据，最佳的臭氧浓度对于获得良好治疗效果是至关重要的，太低的浓度只达到了安慰剂的作用，浓度太高会引出负面作用（不适，疲劳）以至于医生必须在一定的阈值之上使用臭氧去激发急性的、短暂的氧化应激，进而足以触发没有生物毒性的生物学影响。
总之，对于读者来讲非常清楚的是臭氧化的过程无论发生在血液中，或是椎间盘，或是肌肉内都是一种急性氧化应激。但是依据正确的臭氧剂量，经过精确的计算，臭氧治疗是无害的，而且实际上能够激发多种有益的生物学反应，同样可能逆转由于正常衰老、慢性炎症、糖尿病、动脉粥样硬化、退行性过程、癌症引发的慢性氧化应激。实际上，臭氧的治疗作用被解释成一种无毒的，但是仅仅是一种恢复自我平衡的治疗性休克。
什么是活性氧和脂质氧化物引出的生物学效应
臭氧化过程被活性氧（ROS）和脂质氧化物（LOPs）的生成分为两个阶段。无论是发生在血管外还是在血管内，活性氧生成之后立即发生作用，很快消失。脂质氧化物通过体液循环分布到组织的各个部分，最后只有一些分子与细胞受体结合。以上两种物质的药物动力学特点使它们潜在毒性最小化，同时使它们变为迟发的和长效的“信使”。
血浆中活性氧的生成是极为迅速的，可以被短暂的、小量的臭氧激发获得，根据臭氧剂量的不同，机体抗氧化能力发生5％至25％的下降。重要的是，机体抗氧化能力在15至20分钟内恢复正常水平得益于被氧化物有效的循环，如从脱氢抗坏血酸到维生素Ｃ的过程。过氧化氢可以轻易的在血浆和细胞之间扩散，在细胞浆中突然出现代表着触发性的刺激物：根据细胞类型的不同。不同的生物化学路径将被同时激发在红细胞、粒性白细胞、血小板进而发生众多的生物学影响。需要说明的是在血浆和细胞浆之间存在这一个梯度。细胞内过氧化氢的浓度是仅仅大约是血浆内的1/10。过氧化氢会被血浆中的高浓度谷胱甘肽、或氧化氢酶、谷胱甘肽过氧物酶还原，虽然如此，为了激发若干生物化学反应路径过氧化氢必须在阈值浓度以上。
作为细胞内重要的信使分子之一的过氧化氢作用与不同血细胞。大量的红细胞中和了大量过氧化氢。谷胱甘肽被氧化成氧化型谷胱甘肽。对于谷胱甘肽还原型与氧化型的比率非常敏感，细胞会通过平移氧化型谷胱甘肽或是靠支出维生素Ｃ或是还原型辅酶Ⅱ（作为重要的电子供应者）来还原氧化型谷胱甘肽。接下来，氧化型辅酶II在激发磷酸戊糖途径后被还原，在这个过程中葡萄糖6－磷酸脱氢酶是关键酶。我们已经测出ATP的生成有小量的但是显著的增加。但是戊糖循环循环或是磷酸果糖激酶或是两者同时被激发仍然需要被澄清。另外，在短时间内，回输红细胞提高了氧（O2）对于缺血组织的传递，因为基于波尔效应造成细胞内PH值的轻度下降和/或2,3二磷酸甘油酸酯（2,3-DPG）水平的提高使氧血红蛋白解离曲线向右侧转换。显然，一次臭氧自体血回输治疗的效果是非常小的，我们需要臭氧氧化至少2.5至4升的血液在30－60天之内。在这段时期内，脂质氧化物作为对于骨髓的重复应激因子，伴有抗氧化酶的红细胞发生过程中，经常性的刺激造成机体对于臭氧应激的适应。结果是，接受臭氧治疗伴有肢体缺血的患者能够得到临床改善，因为日益增多的红细胞生成能够将氧气更多的带到患者的缺血组织。但是，最终的改善也是由于缺血局部从血小板和内皮细胞释放的NO、CO、生长因子。
尽管臭氧是最有潜力的抗感染药物之一，矛盾的是它还是不能灭活在活体内的细菌、病毒、真菌，因为病原体会被很好的保护，特别是在细胞内，通过强大的抗氧化系统。因此，臭氧通过刺激中性粒细胞和刺激某些细胞因子的合成。过氧化氢再一次作为重要的信使，进入血液单核细胞细胞浆，通过氧化半胱氨酸，激活酪氨酸激酶，磷酸化转录因子、核因子KB,该因子导致异源二聚体（P50+P65）的释放。这个因子继续进入细胞核，打开数百个因子，它们对于若干蛋白合成起到作用，在这些蛋白中有急性期反应物和许多的白介素。在以往，我们已经在体外环境中监测过从臭氧血释放的若干细胞因子。一旦臭氧化的粒细胞进入循环后，它们就会淋巴微环境下安家，连续的释放细胞因子，通过旁分泌方式对于临近的细胞进行抑制状态免疫系统的再激活。以上被形容为生理性细胞因子反应，这个过程是内生性免疫系统的一部分，帮助我们在有害环境中生存。
在血液臭氧化的过程中，特别是用肝素进行抗凝时，我们注意到血小板活性发生剂量依赖性的增长，伴有连续典型的生长因子的释放，它们会在缺血性病人中会增强慢性溃疡的愈合。无论什么时候可能的话，肝素作为抗凝剂的作用应该枸橼酸钠替代，因为它会加强生物化学方面和电子传递传递方面的反应。
在臭氧处理的血液重新输入供体的过程中，大量的内皮细胞将会被脂质氧化物激活，从而导致NO、血浆S－亚硝基硫醇和S－亚硝基血红蛋白蛋白的产生增多。NO的半衰期不到一秒，蛋白绑定NO可以发挥血管扩张作用，在远端的缺血血管处仍然有相关的治疗作用。
另外，基于有机体对于低水平的臭氧暴露存在耐受现象，高水平暴露存在有害结果的现象，应该诱导一个机体适应的和产生有益效果的反应。假设脂质氧化物作为一个远程的信使，脂质氧化物可以传递急性氧化应激的信息到所有的器官。因为它能够在红细胞发生过程中上调抗氧化酶，与骨髓特别相关，允许可能向再生的梗塞的器官释放雄蕊细胞。另外，对于内分泌腺和中枢神经系统的刺激可以帮助我们理解为什么大多数患者在臭氧治疗过程中会出现轻松的感觉。或许因为提高的代谢水平，或是提高的激素或是神经递质的释放。
臭氧可以诱导能够逆转慢性氧化应激的抗氧化反应矛盾的事实普遍存在与动植物世界，基于这种现象有非常多的实验事实。另外，关于在臭氧治疗过程中升高的抗氧化酶和HO-1也支持上述事实。除了作为一种氧化剂的情况，正确的使用臭氧可以提高抗氧化能力，抗氧化能力是机体度过病毒感染、缺血、细胞退行性变的重要因素。
臭氧使用方法
臭氧临床应用有很大的灵活性，但是不应该在气态下进行静脉内注射，考虑到气体混合物中含有不小于95％的氧气，因此存在导致氧气栓塞的危险。目前最成熟、最可靠的方法一直“大自体血回输疗法”，根据病人体重的不同，使用的血量也不等，同时混合同样体积的混合气体（O2–O3），同时臭氧浓度被精确控制。进行自体血回输疗法的相关耗材必须是具有抗臭氧的性质。血液从肘静脉中被抽出来，然后与机体、浓度预先设定的混合气体相混合。为了避免泡沫产生应该避免强烈的震荡。通过5至10分钟的混合血液已经充分的臭氧化，最后用约15分钟时间将血液回输人体。这种治疗方法对于血管疾病的治疗已经表现出强于传统药物的效果。
直到现在局限于大自体血回输疗法和直肠气体灌注已经被扩展，还包括准全身身体暴露疗法（臭氧蒸汽箱等），臭氧体外血液循环疗法。部分皮肤暴露疗法不需要任何静脉穿刺，因为皮肤的暴露面积比较大，会产生非常好的作用。现在，我们可以根据不同的病理、疾病发展阶段、病人的情况选择最适合的治疗方式。
小自体血疗法使用5ml的静脉血与高浓度的臭氧相混合，然后进行肌肉注射，一般注射到臀大肌里面。主要用于激发非特异性免疫反应。
在上个世纪90年代初出现了一种不必要的臭氧治疗的相似形式。通过使用紫外线、微量臭氧和保持血液42.5℃的温度，进行血液原始的臭氧治疗。在没有澄清使用三个物理化学应激的理论前，这个方法显得是多余的。因为臭氧作为一种氧化剂的作用已经是足够了。引入另外两个因素对于治疗的方案的解释变得非常困难。在针对艾滋病的治疗前瞻性研究中，治疗效果显示出毒性或无效性。这种疗法只会加大对于臭氧应用的不信任。
基于过去得到的临床数据和每一个人血液平均抗氧化能力的不同，我们已经制定出针对大自体血回输疗法所谓的“治疗窗口”，也就是一定的臭氧浓度，既不能长生毒性，同时还可以产生治疗效果。治疗有效范围为10－15微克/毫升作为最小值，80微克/毫升为最大值。每一个人的抗氧化能力有15－20微克/毫升的差异，更安全的值应该被设定为60微克/毫升以下，治疗将会没有任何溶血的危险。臭氧的氧化活性会被细胞内和血浆中的抗氧化物中和，所以10微克/毫升以下的臭氧会被中和。只有微量的活性氧和脂质氧化物可以探测，所以在非常低浓度的臭氧，自体血回输疗法仅仅作为安慰剂来使用。一般情况下，我们可以使用每周两次的治疗，如果必须的话，我们可以每天一次，甚至每天三次。
臭氧治疗范围
无论任何时候传统医学不能解决某个医学问题，在开始臭氧治疗之前，医生都有责任给病人所有可能的治疗选项。臭氧治疗可以治疗各种慢性缺血疾病、缺血和糖尿病造成的皮肤慢性溃疡，萎缩性老年黄斑变性以及各种免疫相关疾病。在慢性肢体缺血，传统治疗用类前列腺素滴注进行治疗，疗效低于臭氧治疗，治疗费用比臭氧昂贵。臭氧治疗可以治愈70％的黄斑变性（干性），因为传统医学没有良好的治疗选项。以下列举臭氧联合传统治疗的疾病：
1、 慢性缺血性疾病（脑、心脏）。臭氧可以发挥有益的治疗影响。因为：A、提高缺血组织内氧、葡萄糖、ATP的运送；B、增强血管新生、促进造血干细胞的植入，进而提高新血管形成和组织再生；C、通过上调抗氧化酶和血红素加氧酶I的表达诱导预处理现象；D、触发神经元介质反应，改善生活质量。实验显示对于晚期心脏病患者，移植和外科血管成形术已经不适合的，联合臭氧治疗和常规治疗可以改善病人的预后。
2、 骨科疾病（背痛问题）。臭氧椎间盘注射可以打到约75％的成功率，是少数几项可以通过微创的方法解决疝出椎间盘的先进方法之一。对于治疗骨关节病和关节肌腱炎也有三分之二的有效率，显效机理和抗伤害系统的活化有关联。
3、 急、慢性感染性疾病，对于抗生素或化疗耐药细菌、病毒、真菌。甚至寄生虫感染，如：梨形鞭毛虫病、隐孢子虫病，在古巴医生用臭氧油进行治疗。
4、 紧急情况，如在大面积创伤、烧伤、急性腹膜炎、毒血症之后造成的多器官功能衰竭和死亡。联合最好的传统治疗和一天3至4次的臭氧大自体血疗法可以避免或降低代谢损伤的恶化，降低死亡率。另外，等待器官的病人可以在手术前在6至15天之间进行6至8次的臭氧大/小自体血疗法可以提高对于感染的抵抗力和改善免疫抑制（因为麻醉或外科手术）。同时可以减低器官移植后的缺血再灌流损伤。其他的一般手术也可以将臭氧治疗作为手术前的准备型治疗。
5、 骨髓炎、脓胸、腹膜炎、脓疮、褥疮、慢性溃疡、糖尿病足、烧伤、感染性伤口、念珠菌病、甲癣，以上疾病经常伴有抗生素耐药细菌。如耐二甲氧基苯青霉素金色葡萄球菌，抗生素对于感染区域缺乏贯穿，和许多发生在许多发达国家的死亡病例都有联系。在这样病例，臭氧化的自体血回输疗法和局部使用臭氧化橄榄油或葵花籽油起到快速的抗菌作用，并且令人难以置信的加快伤口愈合。不幸的是臭氧油应用几乎不被知道。非常有趣的是，臭氧作为一种非常不稳定的气体可以被不饱和脂肪植物油化合为一种稳定的臭氧化物。当臭氧化油被涂在伤口创面的渗出液上，臭氧化油与生物分子反应，生成并释放稳定的过氧化氢。消毒作用和改善的氧化作用可以加速疤痕的形成。一般的传统的药膏经过会含有无用的抗生素和生长因子。臭氧化油一旦被人们知道、使用，必将对数以百万的患者起到极大的治疗作用。
6、 疱疹病毒感染（HHVI和II）、带状疱疹、乳头瘤病毒感染。使用肌肉内注射的小自体血臭氧疗法，作为一种字体疫苗，同时结合臭氧油的局部应用对于预防疱疹的复发非常有作用。这种方法，特别是当联合使用阿昔洛维时，可以治愈绝大部分的疱疹感染病人。同时对于减低带状疱疹感染和感染之后的神经痛也有非常好的效果。
7、 慢性肝炎和艾滋病感染可能的话必须分别的进行干扰素或搞活性抗逆转录酶治疗，因为上述药物常常可以降低病毒载量。但是，臭氧可以同时作为一种有用的辅助治疗。
8、 自身免疫性疾病（多发性硬化、类风湿性关节炎、克隆病）。自体血疗法是非常令人鼓舞的。
9、 退行性疾病。自体血疗法可以改善老年性痴呆早期的患者。在另一方面，对于糖尿病性视网膜病、色素性视网膜炎、突聋、慢性耳鸣作用非常小。
10、 肺部疾病（肺气肿、哮喘、COPD、急性呼吸窘迫综合征）。对于COPD的治疗原理如下：A、血液回输，脂质氧化物可以作用内皮细胞表面，提高前列腺环素和NO的释放，而内皮缩血管肽I的释放被抑制。NO和亚硝基硫醇的释放促进血管舒张，而阴离子超氧化物的释放会造成血管紧缩，并且对血小板和内皮细胞产生负面影响；B、缺血组织氧输送的增强、抗氧化酶的加强、血红素加氧酶I中和慢性氧化应激。C、对于免疫系统刺激可以控制慢性肺部感染。通过臭氧治疗COPD可以打到良好的效果，包括改善呼吸系数和步行试验。
11、 晚期肾病被慢性氧化应激加重，不能被传统药物控制，臭氧治疗稳定严重的功能障碍，提高病人的生活治疗。
12、 臭氧自体血回输疗法联合臭氧油的局部应用被证明对于代谢综合征非常有效，比如2型糖尿病患者的难治性慢性溃疡。控制血糖水平是必须的。
13、 皮肤病（牛皮癣、异位性皮炎）。
14、 化疗药耐药的转移癌、癌性疲劳。通过臭氧治疗可以提高病人的生活质量，但是不可以阻断癌症的发展。另一方面，外科手术之后臭氧治疗非常有效，不仅可以通过诱导抗氧化反应强化细胞毒药物的作用，而且可以降低化疗药的毒性。
15、 慢性疲劳综合征和纤纬肌痛。自体血疗法已经被发现对于大多数的病人有效。
16、 口腔科。臭氧对于治疗牙根腐烂损伤非常有效。臭氧油对于治疗口疮性溃疡愈合及止痛效果非常好。
结论与展望
人们一直在思考臭氧治疗是否是陈旧的？是否值得花时间去继续？接受过臭氧治疗的病人都会回答，那是非常值得的。现在存在非常好证据来说明臭氧的如何起到效果，同时没有毒性的准确溶度10―60微克/毫升之间。
不幸的是，在过去曾经出现过使用静脉注射的方法进行臭氧应用，现在已经被禁止了！陈述臭氧不能应用于治疗的观点来源与臭氧对于被洗红细胞的实验，在那种情况下，红细胞没有血浆抗氧化物的保护，同时也没有认识到内源性慢性氧化应激每天都存在在身体中。经过精确计算的、短暂的、外源性的氧化应激是臭氧治疗的关键。任何药物都有剂量依赖的毒性或是治疗性。以下的实验是令人瞩目的。正常葡萄糖浓度在血浆中是0.7至1 mg/mL，对于生命至关重要。但是浓度下降到0.4 mg/mL以下时候，低血糖昏迷是致命的。如果血糖高于1.3 mg/mL，将会诱导代谢综合征。关于臭氧的教条是没有意义的，经过数以百万计的治疗，从来没有发生过急、慢性毒性反应。而且绝大多数的患者报告了良好的感觉。
臭氧不可以根治ARMD或其他慢性疾病，而是作为一种支持治疗。臭氧治疗可以提高一般情况，维持良好的生活质量。另一方面，传统医学，除了抗生素、抗病毒、抗体治疗的若干疾病和放化疗效果不佳的癌症之外，传统医药同样不能根治人们的疾病，如动脉粥样硬化、晚期癌症、糖尿病、退行性疾病、自身免疫性疾病。
除了臭氧治疗，在过去的十年中分子生物学和基因治疗巨大进展不足以列入可比较的革新，还有很多困难需要克服。人们不能轻易指出当一种新疗法从实验鼠到人应用的过程存在陷阱。这就是为什么世界范围内盛行补充医学，不光在欠发达国家，在发达国家同样如此，在美国也一样。现在人们经常对于高科技非常失望。另外，常规治疗经常有副作用，大约55000美国人可能已经失去生命，是因为服用了声名狼藉的Vioxx（万络，含rofecoxib的抗关节炎药）。
臭氧治疗获得了日益增长的全世界的瞩目。臭氧医学现在已经拥有了关于在一些疾病中，理解和推荐臭氧治疗作为首选或是联合传统治疗的总体知识框架。现在，臭氧已经可以被通过生物化学水平和临床水平进行验证。到目前为止，最先进、可靠的应用方法还是臭氧大自体血疗法，但是现在我们有多种可能方式，我们可以为不同的情况挑选最适合的应用方式。
关于慢性病，现在的问题是官方医学趋向与治疗症状胜过治疗病因。除了病因太复杂或不清之外，治疗手段经常是局限的，疗效仍然不满意。在另外一方面，简单气体分子，如臭氧，作用于很多目标，至少可以部分的恢复已经失衡的功能活性。有非常好的理由相信，臭氧的治疗作用包括同时提高血液循环和氧运输，增强组织激素分泌，细胞因子，生长因子，减低内源性、慢性氧化应激。换句话，臭氧治疗扮演了生物反应调节者的角色。
Archives of Medical Research 37 (2006) 425–435
Velio Alvaro Bocci
Department of Physiology, Universityof Siena, Siena, Italy
Received for publication May 26, 2005; accepted August 26, 2005 (ARCMED-D-05-00204).
此篇文章的目的在于消除和澄清对于臭氧治疗仪器的误解和偏见，阐明以及溶于生物体液中臭氧作用的药理学机制。文章收集了近十年实验室工作，意在阐明应用在一些疾病的臭氧治疗。
2006 IMSS. Published by Elsevier Inc.
Key Words: Ozone, Antioxidants, Oxidative stress, Ozone tolerance, Ozone therapy.
序言
令人感到遗憾的是人们对于简单知道臭氧剂量的兴趣大于知道臭氧如何起作用以及为什么我们可以避免臭氧的毒性。以上的行为反应了人们对于臭氧基础知识的缺乏，反应了在以前应用臭氧之前的一种肤浅的仓促的准备。其实并不惊奇，在臭氧医学发展的初期，经验主义者起了很大的作用，当然也有几十年前科技不发达的原因以及作为不是专利产品的臭氧应用得不到资金支持的因素。1984年，德国已经命令禁止了臭氧的静脉注射这种治疗，因为有产生气栓的危险。还有就是禁止了用生理盐水混合臭氧进行静脉输注，因为溶液中可能产生过氯酸。美国有一名化学家断言“无论如何臭氧都是有毒”，加深了人们对于臭氧不能用于医学的错误观念。
在过去的十几年中，欧洲的科学家在临床水平和基础研究水平以严谨的科研风格进行了大量的工作来检测臭氧治疗。我们现在可以知道臭氧是如何起作用的，如何控制臭氧的毒性，如何扩大臭氧的治疗作用。基于经典的生物化学、生理学、药理学进行医学臭氧作用机理的研究使我们没有必要借用哲学思想来阐述相关的问题。
什么是臭氧，我们如何应用臭氧
臭氧是三个氧原子组成的具有环状结构的分子。医用臭氧发生器通过使用医用纯氧通过高电压来生成臭氧。结果是我们得到的气体是一种臭氧浓度不大于5％和氧气浓度不小于95％的混合气体。生成和承载臭氧的设备与介质都应该是具有抗臭氧的性质，如不锈钢、特富龙、玻璃、超高分子聚乙烯等材料。臭氧的密度是氧气的1.6倍，在水中的溶解性是氧气的10倍（在0摄氏度，100ml水中，可以溶解49ml的臭氧气体）。尽管臭氧不是一个自由基分子，但是它却有极强的氧化性，仅仅排在氟和过硫酸盐之后列所有氧化剂的第三位。臭氧是一种不稳定的气体，医用臭氧如不经过特殊的处理，应该制备之后立即使用，因为在常压下，周围温度是20摄氏度的情况下，臭氧的半衰期为40分钟。
臭氧是一种有争议的气体，尽管在大气层的平流层可以吸收B波段和C波段的紫外线辐射，在大气层的对流层对于呼吸道是有害的，特别是在光化学烟尘中和一氧化碳，二氧化氮和微量的酸混合时。
有一点是非常清楚的，如果我们在医学工作中使用臭氧，我们必须避免臭氧的毒性。如果我们操作足够细心，我们一定可以控制臭氧的毒性。
1、 使用剂量精确的臭氧发生器，设备配以标准良好光度计量计，进而允许我们实时的控制臭氧的浓度和剂量。
2、 通过预先设定浓度来制备精确体积的臭氧气体。臭氧的总体剂量可以通过臭氧浓度乘以臭氧体积来计算出臭氧的具体重量。现在已经有高档的臭氧发生器可以直接显示输出臭氧的质量。
3、 我们必须知道获得没有任何副总用而且具有最好治疗效果的最佳治疗剂量。
眼睛和肺脏对于臭氧是非常敏感的，因为这两个器官只有有最小的抗氧化和中和能力，因此臭氧不应该直接接触这些器官。
臭氧接触体液之后变化与行为
以下基本概念对于我们必须牢记：
1、 像其他气体一样，臭氧单纯的溶于纯水，根据亨利定律，和水温，气压，臭氧的浓度有关。封闭的容器中，臭氧不会发生作用。臭氧水作为一种有效的抗菌剂会保持活性数天的时间。
2、 在另外一方面，接触到生物液体（生理盐水、血浆、淋巴液、尿液）后，臭氧立即发生作用，进行反应。原子氧是非常具有活性的原子。需要强调的是，发生上述反应之后，臭氧将不再存在。而不是像以前的错误观念“臭氧会穿过皮肤和粘膜进入细胞”。在进行反应的顺序上，臭氧会和多不饱和脂肪酸，抗氧化物（尿酸、维生素C），巯基化合物（半胱氨酸、还原型谷胱甘肽，白蛋白）进行反应。根据臭氧浓度的不同，臭氧也可能和酶、碳水化合物、DNA、RNA发生反应。所有以上的化合物都是作为一种电子的供应者，承受着氧化作用。
3、 主要反应为：
R-CH＝CH-R＋O3＋H2O R-CH＝O + R’-CH=O + H2O2
该反应显示，在形成一摩尔的过氧化氢（过氧化氢是活性氧家族的一员，ROS）的同时，反应会产生两摩尔的脂质氧化物（LOPs）。活性氧家族中主要的分子就是过氧化氢，是一个非自由基的氧化剂，能够作为臭氧的信使负责引出下一步的生物学和治疗学方面的影像。活性氧被认为是有害的概念现在已经被校正，因为在生理量的情况，过氧化氢作为信号转录的调节器，并且充当宿主防御和免疫反应重要的中介物。
4、 脂质氧化物在多不饱和脂肪酸发生过氧化反应后出现在血浆中，生成的脂质氧化物是各种各样的，包括：脂过氧化物、烷氧基自由基、脂氢过氧化物、异前列烷、烯烃（4羟基反-2-壬烯醛、丙二酰二醛）。自由基和醛有内在的毒性，必须被控制在非常小的浓度。在体外实验中，幸运的是脂质氧化物表现出比活性氧更具有稳定性。它们在血液回输过程中，以上生成物被体液所稀释，被谷胱甘肽转移因子和醛脱氢酶代谢掉。所以只有微量的脂质氧化物可以到达体内的所有器官，特别是骨髓、肝脏、中枢神经系统，内分泌腺等。脂质氧化物在所到达的器官作为急性氧化应激的信号分子。
如果疾病的发展没有到非常晚期的时候，脂质氧化物能够引起抗氧化酶（超氧化歧化酶、谷胱甘肽过氧化酶、谷胱甘肽还原酶、过氧化氢酶）的上调。有趣的是，通过诱导谷氨酸半胱氨酸连接酶的表达，4羟基反-2-壬烯醛（NHE）可以造成细胞内谷胱甘肽的增加，谷胱甘肽在抗氧化防御中有关键的作用。另外，脂质氧化物诱导氧化应激蛋白，是血红素加氧酶I型(HO-1或HSP-32)，在血红素分子破坏后，血红素加氧酶会释放出非常有用的化合物，如胆红素和CO。胆红素是非常好的亲脂抗氧化物，微量的CO的可以和NO共同作用通过激活环状环磷腺苷来调节血管舒张。血液中的铁通过螯合作用与上调的铁蛋白结合。氧化应激之后的血红素加氧酶I型诱导作用被数以百计的文章描述为最重要的抗氧化防御和保护酶之一。另外，脂质氧化物诱导神经免疫调节作用，在臭氧治疗过程中，病人良好的感觉就是上述反应的外在躯体表现。
尽管作为一种科学推测，在治疗整个过程中，脂质氧化物在骨髓的微环境中作为急性氧化应激因子刺激金属蛋白酶的释放，特别是金属蛋白酶MP-9可以促进雄蕊细胞的分化，这些细胞一旦进入血液循环会被吸引和“安家”到以前发生损伤的地方（创伤或缺血性退行性事件）。这样事件潜在的关联性有巨大的实际应用的重要性，在需要进行连续的不确定的再滴注时，将会避免不自然的，昂贵的、几乎没有实际作用的骨髓收集
需要强调的是微量的脂质氧化物将是有益的和激发性的。而高浓度的脂质氧化物将是有毒的。基于许多实验数据，最佳的臭氧浓度对于获得良好治疗效果是至关重要的，太低的浓度只达到了安慰剂的作用，浓度太高会引出负面作用（不适，疲劳）以至于医生必须在一定的阈值之上使用臭氧去激发急性的、短暂的氧化应激，进而足以触发没有生物毒性的生物学影响。
总之，对于读者来讲非常清楚的是臭氧化的过程无论发生在血液中，或是椎间盘，或是肌肉内都是一种急性氧化应激。但是依据正确的臭氧剂量，经过精确的计算，臭氧治疗是无害的，而且实际上能够激发多种有益的生物学反应，同样可能逆转由于正常衰老、慢性炎症、糖尿病、动脉粥样硬化、退行性过程、癌症引发的慢性氧化应激。实际上，臭氧的治疗作用被解释成一种无毒的，但是仅仅是一种恢复自我平衡的治疗性休克。
什么是活性氧和脂质氧化物引出的生物学效应
臭氧化过程被活性氧（ROS）和脂质氧化物（LOPs）的生成分为两个阶段。无论是发生在血管外还是在血管内，活性氧生成之后立即发生作用，很快消失。脂质氧化物通过体液循环分布到组织的各个部分，最后只有一些分子与细胞受体结合。以上两种物质的药物动力学特点使它们潜在毒性最小化，同时使它们变为迟发的和长效的“信使”。
血浆中活性氧的生成是极为迅速的，可以被短暂的、小量的臭氧激发获得，根据臭氧剂量的不同，机体抗氧化能力发生5％至25％的下降。重要的是，机体抗氧化能力在15至20分钟内恢复正常水平得益于被氧化物有效的循环，如从脱氢抗坏血酸到维生素Ｃ的过程。过氧化氢可以轻易的在血浆和细胞之间扩散，在细胞浆中突然出现代表着触发性的刺激物：根据细胞类型的不同。不同的生物化学路径将被同时激发在红细胞、粒性白细胞、血小板进而发生众多的生物学影响。需要说明的是在血浆和细胞浆之间存在这一个梯度。细胞内过氧化氢的浓度是仅仅大约是血浆内的1/10。过氧化氢会被血浆中的高浓度谷胱甘肽、或氧化氢酶、谷胱甘肽过氧物酶还原，虽然如此，为了激发若干生物化学反应路径过氧化氢必须在阈值浓度以上。
作为细胞内重要的信使分子之一的过氧化氢作用与不同血细胞。大量的红细胞中和了大量过氧化氢。谷胱甘肽被氧化成氧化型谷胱甘肽。对于谷胱甘肽还原型与氧化型的比率非常敏感，细胞会通过平移氧化型谷胱甘肽或是靠支出维生素Ｃ或是还原型辅酶Ⅱ（作为重要的电子供应者）来还原氧化型谷胱甘肽。接下来，氧化型辅酶II在激发磷酸戊糖途径后被还原，在这个过程中葡萄糖6－磷酸脱氢酶是关键酶。我们已经测出ATP的生成有小量的但是显著的增加。但是戊糖循环循环或是磷酸果糖激酶或是两者同时被激发仍然需要被澄清。另外，在短时间内，回输红细胞提高了氧（O2）对于缺血组织的传递，因为基于波尔效应造成细胞内PH值的轻度下降和/或2,3二磷酸甘油酸酯（2,3-DPG）水平的提高使氧血红蛋白解离曲线向右侧转换。显然，一次臭氧自体血回输治疗的效果是非常小的，我们需要臭氧氧化至少2.5至4升的血液在30－60天之内。在这段时期内，脂质氧化物作为对于骨髓的重复应激因子，伴有抗氧化酶的红细胞发生过程中，经常性的刺激造成机体对于臭氧应激的适应。结果是，接受臭氧治疗伴有肢体缺血的患者能够得到临床改善，因为日益增多的红细胞生成能够将氧气更多的带到患者的缺血组织。但是，最终的改善也是由于缺血局部从血小板和内皮细胞释放的NO、CO、生长因子。
尽管臭氧是最有潜力的抗感染药物之一，矛盾的是它还是不能灭活在活体内的细菌、病毒、真菌，因为病原体会被很好的保护，特别是在细胞内，通过强大的抗氧化系统。因此，臭氧通过刺激中性粒细胞和刺激某些细胞因子的合成。过氧化氢再一次作为重要的信使，进入血液单核细胞细胞浆，通过氧化半胱氨酸，激活酪氨酸激酶，磷酸化转录因子、核因子KB,该因子导致异源二聚体（P50+P65）的释放。这个因子继续进入细胞核，打开数百个因子，它们对于若干蛋白合成起到作用，在这些蛋白中有急性期反应物和许多的白介素。在以往，我们已经在体外环境中监测过从臭氧血释放的若干细胞因子。一旦臭氧化的粒细胞进入循环后，它们就会淋巴微环境下安家，连续的释放细胞因子，通过旁分泌方式对于临近的细胞进行抑制状态免疫系统的再激活。以上被形容为生理性细胞因子反应，这个过程是内生性免疫系统的一部分，帮助我们在有害环境中生存。
在血液臭氧化的过程中，特别是用肝素进行抗凝时，我们注意到血小板活性发生剂量依赖性的增长，伴有连续典型的生长因子的释放，它们会在缺血性病人中会增强慢性溃疡的愈合。无论什么时候可能的话，肝素作为抗凝剂的作用应该枸橼酸钠替代，因为它会加强生物化学方面和电子传递传递方面的反应。
在臭氧处理的血液重新输入供体的过程中，大量的内皮细胞将会被脂质氧化物激活，从而导致NO、血浆S－亚硝基硫醇和S－亚硝基血红蛋白蛋白的产生增多。NO的半衰期不到一秒，蛋白绑定NO可以发挥血管扩张作用，在远端的缺血血管处仍然有相关的治疗作用。
另外，基于有机体对于低水平的臭氧暴露存在耐受现象，高水平暴露存在有害结果的现象，应该诱导一个机体适应的和产生有益效果的反应。假设脂质氧化物作为一个远程的信使，脂质氧化物可以传递急性氧化应激的信息到所有的器官。因为它能够在红细胞发生过程中上调抗氧化酶，与骨髓特别相关，允许可能向再生的梗塞的器官释放雄蕊细胞。另外，对于内分泌腺和中枢神经系统的刺激可以帮助我们理解为什么大多数患者在臭氧治疗过程中会出现轻松的感觉。或许因为提高的代谢水平，或是提高的激素或是神经递质的释放。
臭氧可以诱导能够逆转慢性氧化应激的抗氧化反应矛盾的事实普遍存在与动植物世界，基于这种现象有非常多的实验事实。另外，关于在臭氧治疗过程中升高的抗氧化酶和HO-1也支持上述事实。除了作为一种氧化剂的情况，正确的使用臭氧可以提高抗氧化能力，抗氧化能力是机体度过病毒感染、缺血、细胞退行性变的重要因素。
臭氧使用方法
臭氧临床应用有很大的灵活性，但是不应该在气态下进行静脉内注射，考虑到气体混合物中含有不小于95％的氧气，因此存在导致氧气栓塞的危险。目前最成熟、最可靠的方法一直“大自体血回输疗法”，根据病人体重的不同，使用的血量也不等，同时混合同样体积的混合气体（O2–O3），同时臭氧浓度被精确控制。进行自体血回输疗法的相关耗材必须是具有抗臭氧的性质。血液从肘静脉中被抽出来，然后与机体、浓度预先设定的混合气体相混合。为了避免泡沫产生应该避免强烈的震荡。通过5至10分钟的混合血液已经充分的臭氧化，最后用约15分钟时间将血液回输人体。这种治疗方法对于血管疾病的治疗已经表现出强于传统药物的效果。
直到现在局限于大自体血回输疗法和直肠气体灌注已经被扩展，还包括准全身身体暴露疗法（臭氧蒸汽箱等），臭氧体外血液循环疗法。部分皮肤暴露疗法不需要任何静脉穿刺，因为皮肤的暴露面积比较大，会产生非常好的作用。现在，我们可以根据不同的病理、疾病发展阶段、病人的情况选择最适合的治疗方式。
小自体血疗法使用5ml的静脉血与高浓度的臭氧相混合，然后进行肌肉注射，一般注射到臀大肌里面。主要用于激发非特异性免疫反应。
在上个世纪90年代初出现了一种不必要的臭氧治疗的相似形式。通过使用紫外线、微量臭氧和保持血液42.5℃的温度，进行血液原始的臭氧治疗。在没有澄清使用三个物理化学应激的理论前，这个方法显得是多余的。因为臭氧作为一种氧化剂的作用已经是足够了。引入另外两个因素对于治疗的方案的解释变得非常困难。在针对艾滋病的治疗前瞻性研究中，治疗效果显示出毒性或无效性。这种疗法只会加大对于臭氧应用的不信任。
基于过去得到的临床数据和每一个人血液平均抗氧化能力的不同，我们已经制定出针对大自体血回输疗法所谓的“治疗窗口”，也就是一定的臭氧浓度，既不能长生毒性，同时还可以产生治疗效果。治疗有效范围为10－15微克/毫升作为最小值，80微克/毫升为最大值。每一个人的抗氧化能力有15－20微克/毫升的差异，更安全的值应该被设定为60微克/毫升以下，治疗将会没有任何溶血的危险。臭氧的氧化活性会被细胞内和血浆中的抗氧化物中和，所以10微克/毫升以下的臭氧会被中和。只有微量的活性氧和脂质氧化物可以探测，所以在非常低浓度的臭氧，自体血回输疗法仅仅作为安慰剂来使用。一般情况下，我们可以使用每周两次的治疗，如果必须的话，我们可以每天一次，甚至每天三次。
臭氧治疗范围
无论任何时候传统医学不能解决某个医学问题，在开始臭氧治疗之前，医生都有责任给病人所有可能的治疗选项。臭氧治疗可以治疗各种慢性缺血疾病、缺血和糖尿病造成的皮肤慢性溃疡，萎缩性老年黄斑变性以及各种免疫相关疾病。在慢性肢体缺血，传统治疗用类前列腺素滴注进行治疗，疗效低于臭氧治疗，治疗费用比臭氧昂贵。臭氧治疗可以治愈70％的黄斑变性（干性），因为传统医学没有良好的治疗选项。以下列举臭氧联合传统治疗的疾病：
1、 慢性缺血性疾病（脑、心脏）。臭氧可以发挥有益的治疗影响。因为：A、提高缺血组织内氧、葡萄糖、ATP的运送；B、增强血管新生、促进造血干细胞的植入，进而提高新血管形成和组织再生；C、通过上调抗氧化酶和血红素加氧酶I的表达诱导预处理现象；D、触发神经元介质反应，改善生活质量。实验显示对于晚期心脏病患者，移植和外科血管成形术已经不适合的，联合臭氧治疗和常规治疗可以改善病人的预后。
2、 骨科疾病（背痛问题）。臭氧椎间盘注射可以打到约75％的成功率，是少数几项可以通过微创的方法解决疝出椎间盘的先进方法之一。对于治疗骨关节病和关节肌腱炎也有三分之二的有效率，显效机理和抗伤害系统的活化有关联。
3、 急、慢性感染性疾病，对于抗生素或化疗耐药细菌、病毒、真菌。甚至寄生虫感染，如：梨形鞭毛虫病、隐孢子虫病，在古巴医生用臭氧油进行治疗。
4、 紧急情况，如在大面积创伤、烧伤、急性腹膜炎、毒血症之后造成的多器官功能衰竭和死亡。联合最好的传统治疗和一天3至4次的臭氧大自体血疗法可以避免或降低代谢损伤的恶化，降低死亡率。另外，等待器官的病人可以在手术前在6至15天之间进行6至8次的臭氧大/小自体血疗法可以提高对于感染的抵抗力和改善免疫抑制（因为麻醉或外科手术）。同时可以减低器官移植后的缺血再灌流损伤。其他的一般手术也可以将臭氧治疗作为手术前的准备型治疗。
5、 骨髓炎、脓胸、腹膜炎、脓疮、褥疮、慢性溃疡、糖尿病足、烧伤、感染性伤口、念珠菌病、甲癣，以上疾病经常伴有抗生素耐药细菌。如耐二甲氧基苯青霉素金色葡萄球菌，抗生素对于感染区域缺乏贯穿，和许多发生在许多发达国家的死亡病例都有联系。在这样病例，臭氧化的自体血回输疗法和局部使用臭氧化橄榄油或葵花籽油起到快速的抗菌作用，并且令人难以置信的加快伤口愈合。不幸的是臭氧油应用几乎不被知道。非常有趣的是，臭氧作为一种非常不稳定的气体可以被不饱和脂肪植物油化合为一种稳定的臭氧化物。当臭氧化油被涂在伤口创面的渗出液上，臭氧化油与生物分子反应，生成并释放稳定的过氧化氢。消毒作用和改善的氧化作用可以加速疤痕的形成。一般的传统的药膏经过会含有无用的抗生素和生长因子。臭氧化油一旦被人们知道、使用，必将对数以百万的患者起到极大的治疗作用。
6、 疱疹病毒感染（HHVI和II）、带状疱疹、乳头瘤病毒感染。使用肌肉内注射的小自体血臭氧疗法，作为一种字体疫苗，同时结合臭氧油的局部应用对于预防疱疹的复发非常有作用。这种方法，特别是当联合使用阿昔洛维时，可以治愈绝大部分的疱疹感染病人。同时对于减低带状疱疹感染和感染之后的神经痛也有非常好的效果。
7、 慢性肝炎和艾滋病感染可能的话必须分别的进行干扰素或搞活性抗逆转录酶治疗，因为上述药物常常可以降低病毒载量。但是，臭氧可以同时作为一种有用的辅助治疗。
8、 自身免疫性疾病（多发性硬化、类风湿性关节炎、克隆病）。自体血疗法是非常令人鼓舞的。
9、 退行性疾病。自体血疗法可以改善老年性痴呆早期的患者。在另一方面，对于糖尿病性视网膜病、色素性视网膜炎、突聋、慢性耳鸣作用非常小。
10、 肺部疾病（肺气肿、哮喘、COPD、急性呼吸窘迫综合征）。对于COPD的治疗原理如下：A、血液回输，脂质氧化物可以作用内皮细胞表面，提高前列腺环素和NO的释放，而内皮缩血管肽I的释放被抑制。NO和亚硝基硫醇的释放促进血管舒张，而阴离子超氧化物的释放会造成血管紧缩，并且对血小板和内皮细胞产生负面影响；B、缺血组织氧输送的增强、抗氧化酶的加强、血红素加氧酶I中和慢性氧化应激。C、对于免疫系统刺激可以控制慢性肺部感染。通过臭氧治疗COPD可以打到良好的效果，包括改善呼吸系数和步行试验。
11、 晚期肾病被慢性氧化应激加重，不能被传统药物控制，臭氧治疗稳定严重的功能障碍，提高病人的生活治疗。
12、 臭氧自体血回输疗法联合臭氧油的局部应用被证明对于代谢综合征非常有效，比如2型糖尿病患者的难治性慢性溃疡。控制血糖水平是必须的。
13、 皮肤病（牛皮癣、异位性皮炎）。
14、 化疗药耐药的转移癌、癌性疲劳。通过臭氧治疗可以提高病人的生活质量，但是不可以阻断癌症的发展。另一方面，外科手术之后臭氧治疗非常有效，不仅可以通过诱导抗氧化反应强化细胞毒药物的作用，而且可以降低化疗药的毒性。
15、 慢性疲劳综合征和纤纬肌痛。自体血疗法已经被发现对于大多数的病人有效。
16、 口腔科。臭氧对于治疗牙根腐烂损伤非常有效。臭氧油对于治疗口疮性溃疡愈合及止痛效果非常好。
结论与展望
人们一直在思考臭氧治疗是否是陈旧的？是否值得花时间去继续？接受过臭氧治疗的病人都会回答，那是非常值得的。现在存在非常好证据来说明臭氧的如何起到效果，同时没有毒性的准确溶度10―60微克/毫升之间。
不幸的是，在过去曾经出现过使用静脉注射的方法进行臭氧应用，现在已经被禁止了！陈述臭氧不能应用于治疗的观点来源与臭氧对于被洗红细胞的实验，在那种情况下，红细胞没有血浆抗氧化物的保护，同时也没有认识到内源性慢性氧化应激每天都存在在身体中。经过精确计算的、短暂的、外源性的氧化应激是臭氧治疗的关键。任何药物都有剂量依赖的毒性或是治疗性。以下的实验是令人瞩目的。正常葡萄糖浓度在血浆中是0.7至1 mg/mL，对于生命至关重要。但是浓度下降到0.4 mg/mL以下时候，低血糖昏迷是致命的。如果血糖高于1.3 mg/mL，将会诱导代谢综合征。关于臭氧的教条是没有意义的，经过数以百万计的治疗，从来没有发生过急、慢性毒性反应。而且绝大多数的患者报告了良好的感觉。
臭氧不可以根治ARMD或其他慢性疾病，而是作为一种支持治疗。臭氧治疗可以提高一般情况，维持良好的生活质量。另一方面，传统医学，除了抗生素、抗病毒、抗体治疗的若干疾病和放化疗效果不佳的癌症之外，传统医药同样不能根治人们的疾病，如动脉粥样硬化、晚期癌症、糖尿病、退行性疾病、自身免疫性疾病。
除了臭氧治疗，在过去的十年中分子生物学和基因治疗巨大进展不足以列入可比较的革新，还有很多困难需要克服。人们不能轻易指出当一种新疗法从实验鼠到人应用的过程存在陷阱。这就是为什么世界范围内盛行补充医学，不光在欠发达国家，在发达国家同样如此，在美国也一样。现在人们经常对于高科技非常失望。另外，常规治疗经常有副作用，大约55000美国人可能已经失去生命，是因为服用了声名狼藉的Vioxx（万络，含rofecoxib的抗关节炎药）。
臭氧治疗获得了日益增长的全世界的瞩目。臭氧医学现在已经拥有了关于在一些疾病中，理解和推荐臭氧治疗作为首选或是联合传统治疗的总体知识框架。现在，臭氧已经可以被通过生物化学水平和临床水平进行验证。到目前为止，最先进、可靠的应用方法还是臭氧大自体血疗法，但是现在我们有多种可能方式，我们可以为不同的情况挑选最适合的应用方式。
关于慢性病，现在的问题是官方医学趋向与治疗症状胜过治疗病因。除了病因太复杂或不清之外，治疗手段经常是局限的，疗效仍然不满意。在另外一方面，简单气体分子，如臭氧，作用于很多目标，至少可以部分的恢复已经失衡的功能活性。有非常好的理由相信，臭氧的治疗作用包括同时提高血液循环和氧运输，增强组织激素分泌，细胞因子，生长因子，减低内源性、慢性氧化应激。换句话，臭氧治疗扮演了生物反应调节者的角色。
